Конструирование плазмиды для экспрессии гена пероксидазы хрена изофермента С2 в клетках дрожжей

Доклады Башкирского университета. 2018. Том 3. № 5. С. 509-513.

Авторы


Мартынова Е. А.
Институт микробиологии НАН Беларуси
Беларусь, 220141 г. Минск, улица. Купревича, 2
Семашко Т. В.*
Институт микробиологии НАН Беларуси
Беларусь, 220141 г. Минск, улица. Купревича, 2
Валентович Л. Н.
Институт микробиологии НАН Беларуси
Беларусь, 220141 г. Минск, улица. Купревича, 2
Жуковская Л. А.
Институт микробиологии НАН Беларуси
Беларусь, 220141 г. Минск, улица. Купревича, 2

Абстракт


Проведена оптимизация кодона гена пероксидазы хрена Armoracia rusticana изоформы С2 ( hrp C2) для экспрессии в клетках дрожжей. На основе pPICZαA сконструирован вектор, несущий синтезированный hrp C2, получены трансформанты Pichia pastoris.

Ключевые слова


  • ген пероксидазы хрена изоформы С2
  • вектор для экспрессии гена
  • трансформация
  • Escherichia coli
  • Pichia pastoris

Литература


  1. Krainer F. W., Glieder A. An updated view on horseradish peroxidases: recombinant production and biotechnological applications // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2015. Vol. 99, №4. P. 1611-1625.
  2. Morawski B., Lin Z., Cirino P., Joo H., Bandara G., Arnold F. H. Functional expression of horseradish peroxidase in Saccharomyces cerevisiae and Pichia pastoris // Protein Eng. 2000. Vol. 13, №5. P. 377-384.
  3. Gundinger T., Spadiut O. A comparative approach to recombinantly produce the plant enzyme horseradish peroxidase in Escherichia coli // Journal of Biotechnology. 2017. Vol. 248. P. 15-24.
  4. Лагодич А. В., Лагодич О. В. Методы анализа нуклеиновых кислот: учеб.-метод. пособие для студентов биол. фак. Минск: Изд-во БГУ, 2013. 47 с.
  5. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. Пер. с англ. [под ред. ак. А. А. Баева и д-р биол. наук К. Г. Скрябина]. М.: Мир, 1984-480 с.
  6. Bullock W. O., Fernandez J. M., Short J. M. XL1-Blue: a high efficiency plasmid transforming recA Escherichia coli strain with β-galactosidase selection // BioTechniques. 1987. Vol. 5. P. 376-378.

Construction of plasmid for expression of horseradish peroxidase gene isoenzyme C2 in yeast cells

Authors


Martynava E. A.
Institute of Microbiology of the National Academy of Sciences of Belarus
2 Kuprevicha Street, 220141 Minsk, Belarus
Semashko T. V.*
Institute of Microbiology of the National Academy of Sciences of Belarus
2 Kuprevicha Street, 220141 Minsk, Belarus
Valentovich L. N.
Institute of Microbiology of the National Academy of Sciences of Belarus
2 Kuprevicha Street, 220141 Minsk, Belarus
Zhukovskaya L. A.
Institute of Microbiology of the National Academy of Sciences of Belarus
2 Kuprevicha Street, 220141 Minsk, Belarus

Abstract


Codon optimization of horseradish peroxidase Armoracia rusticana gene isoform C2 (hrpC2) for expression in yeast cells was carried out. On the basis of plasmid pPICZαA vector containing synthesized hrpC2 was constructed and transformants of Pichia pastoris were obtained.

Keywords


  • horseradish peroxidase gene isoform C2
  • vector for gene expression
  • transformation
  • Escherichia coli
  • Pichia pastoris